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支原體的培養(yǎng)技巧
更新時間:2016-04-14   點擊次數(shù):908次

    支原體(霉形體)的培養(yǎng)技巧支原體是介于病毒與細(xì)菌之間的一類微生物,在自然界廣泛存在,使人和多種動物、植物害病。

    它缺乏細(xì)胞壁而不同于細(xì)菌,能在無細(xì)胞培養(yǎng)基生長繁殖,并含有RNA和DNA而有別于病毒。支原體以二分裂方式繁殖,基本形態(tài)為圓形、絲狀形,后者易形成分枝狀菌絲,因而得名支原體。其大小介于病毒和細(xì)菌之間,zui小直徑125-250nm,可通過濾器?;蚪M小只5×108道爾頓,是已知能自行復(fù)制繁殖的原核生物中zui小的,因而生物合成能力低,體外培養(yǎng)時需要富含營養(yǎng),如血清、酵母浸液、核酸等復(fù)雜成分的培養(yǎng)基才能生長。它生長緩慢,倍增時間1-6小時,zui長需三周才形成菌落。菌落中心長入瓊脂內(nèi)部形成中央較密的核,從上方觀察可見“煎蛋樣”的特殊菌落,因為菌落很小需在低倍鏡下才能看見。Mp從發(fā)酵葡萄糖取得生長所需能量。Uu則是通過水解尿素獲得能量。支原體對抑制細(xì)胞壁合成的青霉類抗生素不敏感,對抑制蛋白質(zhì)合成的抗生素如四環(huán)素和大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的紅霉素等敏感。 

   一般培養(yǎng)比較多的是肺炎支原體(MP),解脲脲原體(UU)是耐酸不耐堿的,UU培養(yǎng)的原理是在于其菌體中含有脲酶,而UU培養(yǎng)基中含有尿素,UU的生長需要其本身的脲酶分解尿素益提供其自身生長所需要的營養(yǎng)物質(zhì),UU培養(yǎng)基中含有指示劑酚紅,由于尿素被分解釋放出氨從而使培養(yǎng)基變堿而使培養(yǎng)基由黃變紅,但是這種紅是一種清亮的紅色,透明澄清無渾濁,UU其適宜的PH值為6.2-6.5,由于尿素分解產(chǎn)氨是PH上升,UU在PH值大于7的條件下會迅速死亡,因此,在培養(yǎng)時要隨時觀察其液體培養(yǎng)基的PH值,一旦看到培養(yǎng)基變紅,要立即取出,以防培養(yǎng)基PH上升導(dǎo)致UU死亡,一般UU需要在培養(yǎng)至對數(shù)生長期時是活力zui強的時候(培養(yǎng)基呈橙紅色變化)。一般UU生長需要24小時。

 

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